新型便攜式微流控晶片系統,可同時區分檢測多種死活病原體
近日,生物醫學檢測技術及儀器bbin宝盈集团黃國亮教授團隊研製的便攜式微流控晶片系統,可以同時區分檢測多種死、活病原體,不僅有效降低了檢測成本,還大幅度簡化了病原體核酸檢測分析的操作步驟。
如何區分活菌和死菌一直是核酸分析分子診斷面臨的共性技術難題,如陰道分泌物中,對死/活白色念珠菌進行準確區分與特異性地檢測,是陰道念珠菌感染(VVC)診斷和抗真菌藥物效果評估的關鍵所在。
實驗室團隊成員首次使用了改進的單疊氮化丙啶(PMAxx)和環介導等溫擴增技術(LAMP),有效實現了白色念珠菌的死/活區分與對應核酸定量檢測。同時還研製了一款便攜式的微流控晶片系統,可以同時區分檢測多種死/活病原體。一次加樣可以並行檢測20種以上不同病原菌,每個反應檢測通道的樣品和試劑消耗僅為0.94微升,為常規試管法(25微升)的1/25,有效降低了檢測成本並大幅度簡化了病原體檢測的操作步驟。
△多種死/活病原體快速檢測區分的便攜式微流控晶片系統圖示
此外,研究人員還針對104—105CFU/mL的白色念珠菌進行了PMAxx濃度的優化。實驗結果顯示,1 mM的PMAxx可以用於臨床樣本中白色念珠菌的檢測。對活菌和死菌混合樣品的測試結果顯示,PMAxx-LAMP法可以有效抑制死菌核酸產生的信號,從而能夠精確反應活菌的數量。同時,他們還利用該技術評估了抗真菌藥物的效果,包括克霉唑,咪康唑和硫康唑。實驗結果證明了基於PMAxx-LAMP的便攜式微流控晶片系統可用於評估多種婦科病原菌的死活,在感染性疾病的藥物篩選和治療效果評價等領域具有良好的應用前景。
黃國亮教授課題組撰寫題為「Quantitative and specific detection of viable pathogens on a portable microfluidic chip system by combining improved propidium monoazide (PMAxx) and loop-mediated isothermal amplification (LAMP)」的研究論文在《Analytical Methods》期刊上發表。